1. 自動洗板機:每孔加入洗滌液350μl,注入與吸出間隔60秒。洗板5次。
2. 手工洗板:甩盡孔內液體,在潔凈的吸水紙上拍干,每孔加洗滌液350μl,浸泡1-2分鐘,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體,在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫;試劑或樣品配制時,均需充分混勻,并盡量避免起泡。
1.加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣時將樣品加于酶標板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。給酶標板覆膜,37℃孵育2小時。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2.棄去液體,甩干,每個孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內配制),酶標板加上覆膜,37℃溫育1小時。
3.棄去孔內液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘,大約350μl /每孔,甩干并在吸水紙上輕拍將孔內液體拍干。
4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內配制)100μl,加上覆膜,37℃溫育1小時。
5.棄去孔內液體,甩干,洗板5次,方法同步驟3。
6.每孔加底物溶液100μl,酶標板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據實際顯色情況酌情縮短或延長,但不可超過30分鐘。當標準孔出現明顯梯度時,即可終止)。
7.每孔加終止液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。
8.立即用酶標儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。應提前打開酶標儀電源,預熱儀器,設置好檢測程序。
9.實驗完畢后將未用完的試劑按規定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結束。
表皮生長因子抗體
表皮生長因子抗體
磷酸化真核翻譯延長因子2抗體
真核延伸因子激酶2抗體
磷酸化真核延伸因子激酶2抗體
真核啟動因子2α抗體
磷酸化一氧化氮合成酶3抗體
真核翻譯延長因子2抗體
癌基因ERG3抗體
豬源產腸毒素性大腸桿菌K88-K99抗體
FAS凋亡抑制分子3抗體
纖維束1抗體
叉頭蛋白P3抗體
免疫球蛋白G Fc段受體I
叉頭蛋白M1抗體
磷酸化雷帕霉素靶蛋白抗體
磷酸化粘著斑激酶抗體
絲聚合蛋白/中間絲蛋白抗體
肺鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體
凝血因子13抗體
濾泡樹突細胞分泌蛋白抗體
纖維母細胞生長因子13抗體
骨骼肌肌球蛋白輕鏈2抗體
口蹄疫病毒A型抗體
腎刷狀緣抗體
FLAG Tag標簽抗體
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