復方氯化銨溶液公司正在銷售的產品：豚鼠間隙連接蛋白37(CX37)試劑盒 Anti-IL6 Antibody組織型纖溶酶原激活劑抗體
豚鼠戊糖素(PTD)試劑盒Anti-IL6 Antibody轉化生長因子β調節(jié)蛋白1抗體
豚鼠胰島素樣生長因子結合蛋白2(IGFBP-2)試劑盒Anti-IL6 Antibody磷酸化微管相關蛋白抗體
豚鼠色氨酰tRNA合成酶(WARS)試劑盒Anti-IL6R A

產品分類：細胞其他

儲存條件：4℃,3個月

用途：用于哺乳動物(或人)細胞離體實驗，肌體灌流、清洗組織，并維持離體組織的正常生理功能

注意事項：無菌溶液，主要由2.5%氯化銨、葡萄糖、碳酸氫鈉等組成,注意防止細菌污染。

公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！

 

 

 

配制與標定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內穩(wěn)定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉株的工作濃度需要根據細胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。

2）  根據細胞類型，設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數（通常是7-10天）內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩(wěn)定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉染細胞的篩選

1）  轉染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

α-,細辛(標準品) Lithium sulfate表皮生長因子受體抗體包裝5g

α-香附(標準品) Sodium oleateEts轉錄因子家族ets1抗體包裝50mg

α－常春藤皂苷（標準品） Tetramethylammonium chloride早期B淋巴因子1抗體包裝100g

β,β-二基烯酰阿寧（標準品） 1-Octanesulfonic acid, sodium salt內皮受體A抗體包裝25g

β-桉葉(標準品) Calcium acetate, monohydrate表皮生長因子受體抗體包裝1g

β-谷甾 Calcium phosphate, tribasic表皮生長因子受體抗體包裝250mg

β-胡蘿卜（標準品） DL-Selenomethionine早期生長應答蛋白1抗體包裝5g

β-欖香;β-嵐香(標準品) Melibiose表皮膜蛋白1抗體包裝1g

β-萘黃(標準品) Sodium oxalate內皮受體蛋白酪激A抗體（腫瘤壞死因子α誘導蛋白4）包裝25g

β-石竹烯(標準品) Sodium tungstate, dehydrate酪蛋白激A4抗體包裝5g

β-香樹(標準品) Succinic anhydride前列腺E受體3抗體包裝1g

β-乙酰氧基異戊酰阿寧 Tween-60雌激受體α抗體包裝5g

γ-基丁(GABA),標準品 Zymosan A from Saccharomyces cerevisiaeENPP3抗體IgG包裝25g

γ-倒捻子 Calcium sulfate, anhydrous絲裂原活化蛋白激1/2抗體包裝5g

（標準品） DCC, Dicyclohexylcarbodiimide胚胎干RAS蛋白抗體包裝1g

紅細菌Rhodobacter│sp. 質量規(guī)格：>99%絲裂原活化蛋白激激6試劑盒20（S)-人參皂苷F2;20(S)-G

小多孢菌Micropolyspora│sp. 質量規(guī)格：>99%,PDK1 activator絲蟲病抗體試劑盒20(s)-人參皂苷F1;Ginseno

硫氧化檸檬胞菌Citreicella│thiooxidans 質量規(guī)格：>98%絲肽抑制劑,Kazal 1型試劑盒人參三;Panaxatriol
復方氯化銨溶液Phospho-Syk (Tyr323) /FITC   熒光標記化非受體型酪氨蛋白激IgG

Phospho-Syk (Tyr525/526) /FITC   熒光標記化非受體型酪氨蛋白激IgG

SYT3/FITC  熒光標記突觸結合蛋白3IgG

SAP-1/FITC  熒光標記抗突觸IgG

Synapsin I /FITC  熒光標記神經突觸1IgG

Syntrophins/SNTA1/Syntrophin α1/FITC  熒光標記神經肌肉接頭蛋白SNTA1IgG

alpha-Synuclein/FITC  熒光標記核突觸蛋白-α（C端）IgG

Synaptopodin/FITC  熒光標記突觸蛋白synaptopodinIgG