詳細介紹
公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
抑胃肽酶溶液 | 1ml | FS-R7521 |
產品分類:酶抑制劑
儲存條件:—20℃,避光,18個月
用途:胃蛋白酶抑制劑
注意事項:工作濃度1umol/L
配制與標定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。
3.色譜條件:以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內穩定可靠。
土壤玫瑰單胞菌環指蛋白215抗體Anti-DRD2 Antibody原鈣黏β10(PCDHβ10)
玉米大斑凸臍蠕孢菌環指蛋白187抗體Anti-DRD5 Antibody原鈣黏β1(PCDHβ1)
圍小叢殼菌磷化指狀蛋白RET抗體Anti-DRD4 Antibody原鈣黏α9(PCDHα9)
枯草芽孢桿菌骨保護蛋白配體抗體(破骨分化因子)Anti-DRP1/DNM1L Antibody原鈣黏α8(PCDHα8)
紅擬迷孔菌磷化成視網膜瘤抑癌蛋白抗體Anti-DROSHA Antibody原鈣黏α7(PCDHα7)
枯草芽孢桿菌G蛋白信號轉導調節因子2抗體Anti-DSG2 Antibody原鈣黏α6(PCDHα6)
氏蜜環菌核受體RXRα抗體Anti-DSG1 Antibody原鈣黏α5(PCDHα5)
香菇Rho相關蛋白激1抗體Anti-DSG2 Antibody原鈣黏α4(PCDHα4)
球毛殼環指蛋白156抗體Anti-DSG3 Antibody原鈣黏α3(PCDHα3)
不吸水鏈霉菌RRAD抗體Anti-DUT Antibody原鈣黏α2(PCDHα2)
鴨疫里氏桿菌Runx3抗體Anti-DSP Antibody原鈣黏α13(PCDHα13)
釀酒酵母Rad51抗體Anti-DUSP3 Antibody原鈣黏α12(PCDHα12)
納西桿菌屬維甲受體RAR α/RAR α抗體Anti-DUSP3 Antibody原鈣黏α11(PCDHα11)
平菇—新平1012維甲受體β抗體Anti-DVL1 Antibody原鈣黏α10(PCDHα10)
長枝木霉Ras相關區域家族1A抗體Anti-DVL2 Antibody原鈣黏α1(PCDHα1)
香菇抵抗抗體Anti-DYNLT1 Antibody原鈣黏9(PCDH9)
蠟樣芽孢桿菌Bacillus│cereus 質量規格:>99%,BR
毛木耳Auricularia│polytricha 質量規格:純度大于98%,BR,一物
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質量規格:≥95%,國
抑胃肽酶溶液ATP4B/H+K+ ATPase/FITC 熒光su標記氫鉀ATPmei通道蛋白IgG規格: 0.2ml
ATP5j/FITC 熒光su標記ATP合成meiH+轉運線粒體F0復合體亞基F6IgG規格: 0.2ml
ATP7A/FITC 熒光su標記銅轉運蛋白質α鏈IgG規格: 0.2ml
ATP7B/FITC 熒光su標記銅轉運蛋白質β鏈IgG規格: 0.2ml
phospho-ATP citrate lyase(Ser455) /FITC 熒光su標記兔抗人、大、小鼠磷suan化三磷suan腺檸檬suan裂解meiIgG規格: 0.2ml
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型,培養基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現,至少選擇5個濃度。
1) 第一天:未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上,37℃,CO2培養過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據細胞類型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩定轉染細胞的篩選
1) 轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。
3) 篩選7天后觀察并評估細胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板,繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。
5) 之后更換正常培養基培養即可。