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公司產品僅供科研研究實驗
一、細胞基本屬性 | |
細胞名稱 | 人B淋巴細胞 |
組織來源 | 外周血 |
商品貨號 | A01X1442 |
種屬來源 | 人 |
產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 |
細胞簡介 | B淋巴細胞的祖細胞存在于胎肝的造血細胞島中 ,此后B淋巴細胞的產生和分 化場所逐漸被骨髓所代替。成熟的B細胞主要定居于淋巴結皮質淺層的淋巴小 結和脾臟的紅髓和白髓的淋巴小結內。 B細胞在抗原刺激下可分化為漿細胞 , 漿細胞可合成和分泌抗體 (免疫球蛋白) ,主要執行機體的體液免疫。 B細胞在骨髓內分化各階段的主要變化為免疫球蛋白基因的重排和膜表面標志 的表達。 B細胞在發育分化過程中 ,同樣也經歷選擇作用 ,以除去非功能性基 因重排B細胞和自身反應性B細胞 ,形成周圍成熟的B細胞庫。 B細胞表面有多 種膜表面分子 ,識別抗原、與免疫細胞和免疫分子相互作用 ,也是分離和鑒 別B細胞的重要依據。 B細胞表面分子主要有白細胞分化抗原、 MHC以及多種 膜表面受體。 |
包被條件 | |
培養基 | 原代B淋巴細胞培養體系 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
生長特性 | 懸浮培養 |
細胞形態 | |
傳代特性 | 根據細胞特性傳代 |
消化液 | 0.25%胰蛋bai酶 |
培養條件 | 氣相:空氣 ,95%; CO2 , 5% |
原代細胞培養:
原代細胞(Primary cells):是指直接從機體取出的組織或細胞獲得單個細胞并在體外進行培養的細胞。這里的組織主要指:組織器官、外周血及胚胎等。
原代細胞培養:由于原代細胞生長緩慢,繁殖一定的代數停止生長(一般10代以內)。所以一般認為:培養的原代的第1和傳代到第10代以內的細胞統稱為原代細胞培養。
具體步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養箱。每15min搖晃一次,消化時間根據腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網過濾細胞,收集;
6. 用培養基重懸,置于培養箱培養。
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注意事項:
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中,消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和技術部溝通。