產品簡介：

雞馬立克氏病是由雞馬立克氏病病毒引起的一種雞的惡性淋巴腫瘤性疾病，屬于α皰疹病毒屬，具有高度的接觸傳染性。ＭＤ以淋巴細胞組織增生，在各內臟器官以及外周神經、肌肉、皮膚、性腺、虹膜中產生單核細胞浸潤和腫瘤為特征。ＭＤ 在世界各地廣泛流行，對養禽業造成巨大的經濟損失。同時該病也是目前唯-一可以用疫苗來預防的腫瘤性疾病。本試劑盒利用實時熒光 PCR 原理，檢測馬立克氏病病毒， 對雞馬立克氏病的診斷有重要指導意義。

產品特點：

一、嚴格的質控體系

所有試劑盒從原料到成品都經過嚴格的質量控制，確保每一盒試劑盒都具有穩定可靠的質量，讓您的檢測結果更可信。

二、高靈敏度

產品經過不斷優化，具有出色的靈敏度，能夠檢測到極微量的雞馬立克病毒核酸，不放過任何潛在的感染風險。

三、便捷操作

綜合各項指標特性，研發出操作便捷的試劑盒。從樣本制備到結果分析，每一步都有清晰的操作指南，即使是新手也能輕松上手。

四、多樣的檢測驗證樣本

該試劑盒經過多種樣本的檢測驗證，適用于各內臟器官以及外周神經、肌肉、皮膚、性腺、虹膜等多種常見樣本，滿足不同的檢測需求。

五、個性化定制服務

專業的研發團隊可為您提供個性化的定制服務，根據您的特殊需求進行產品優化和調整，為您提供更貼合實際的檢測方案。

六、豐富的產品線

除了雞馬立克病毒（MDV）PCR檢測試劑盒，我們還提供Elisa試劑盒以及其它快檢試劑盒，滿足您在不同領域的檢測需求。

七、完善的售前售后服務

我們擁有完善專業的售前售后服務團隊，在您購買前為您提供詳細的產品咨詢和技術支持，購買后為您解決使用過程中遇到的任何問題，讓您無后顧之憂。

產品參數：

產品規格

50T/盒，可滿足一定規模的檢測需求。

檢測方法

實時熒光PCR，具有快速、準確、靈敏等優點。

適用儀器

ABI7500、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。

標本采集

剪取腫瘤組織、病變淋巴結組織。

保存和運輸

采集或處理好的樣品在 2℃~8℃條件下保存應不超過 24 h；若需長期保存，應放置-70℃以下保存，凍融不超過 3 次。

使用方法：

1.樣品處理（樣本處理區）

1.1樣本前處理

組織樣品：每份組織分別從 3 個不同的位置稱取樣品約 1g，手術-剪剪碎混勻后取0.5g 于研磨器中研磨，加入 1.5mL 生理鹽水后繼續研磨，待勻漿后轉至 1.5mL 滅菌離心管中，8000rpm 離心 2min，取上清液 50μL 于 1.5mL 滅菌離心管中；

1.2DNA 提取

1）對上述處理好的標本加入 50μL 核酸提取液，100℃恒溫處理 10min，13,000 rpm 離心 5min，取上清液轉移至新的 1.5mL EP 管，-20℃保存；

2）DNA 的提取也可以采用上海烜雅生物科技股份有限公司生產的 DNA-提取試劑盒（離心柱提取法），請按照試劑盒說明書進行操作。

2.試劑配制（試劑準備區）

根據待檢測樣本總數，設所需要的 PCR 反應管管數為N(N=樣本數+1 管陰性對照+1 管陽性對照；樣品每滿 7 份，多配制 1 份)，每測試反應體系配制如下表：

試劑MDV 反應液酶液

用量（樣本數為 N）20μL1μL

將混合好的測試反應液分裝到 PCR 反應管中，21uL/管。

3.加樣（樣本處理區）

將步驟 1 提取的 DNA、陽性質控品、陰性質控品各取 4μL，分別加入相應的反應管中，蓋好管蓋，混勻，短暫離心。

4.PCR 擴增（核酸擴增區）

4.1將待檢測反應管置于熒光定量 PCR 儀反應槽內；

4.2設置好通道、樣品信息，反應體系設置為 25μL；

熒光通道選擇： 檢測通道（Reporter Dye）FAM， 淬滅通道（Quencher Dye） NONE，ABI 系列儀器請勿選擇 ROX 參比熒光，選擇 None 即可。

4.3推薦循環參數設置：

步驟循環數溫度時間收集熒光信號

11 cycle95℃10min否

240 cycles94℃15sec否

55℃30sec是

5.結果分析判定

5.1結果分析條件設定

設置 Baseline 和 Threshold：一般直接按機器自動分析的結果分析，當曲線出現整體傾斜時，根據分析后圖像調節Baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范圍內調節)、stop 值(一般可在 5~20 范圍內調節)，以及 Threshold 的 Value 值(上下拖動閾值線至高于陰性對照)，重新分析結果。

5.15.2 結果判斷

陽性：檢測通道 Ct 值≤35，且曲線有明顯的指數增長曲線；

可疑：檢測通道 35<Ct 值≤38，建議重復檢測，如果檢測通道仍為 35<Ct 值≤38， 且曲線有明顯的增長曲線，判定為陽性，否則為陰性；

陰性：樣本檢測結果 Ct 值>38 或無 Ct 值。

6.質控標準

陰性質控品：Ct>38 或無 Ct 值顯示；

陽性質控品：擴增曲線有明顯指數生長期，且 Ct 值≤32； 以上條件應同時滿足，否則實驗視為無效。

7.檢測方法的局限性

7.1樣本檢測結果與樣本收集、處理、運送以及保存質量有關；

7.2樣本提取過程中沒有控制好交叉污染，會出現假陽性結果；

7.3陽性對照、擴增產物泄漏，會導致假陽性結果；

7.4病原體在流行過程中基因突變、重組，會導致假陰性結果；

7.5不同的提取方法存在提取效率差異，會導致假陰性結果；

7.6試劑運輸，保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降，出現假陰性或定   量檢測不準確的結果；

7.7本檢測結果僅供參考，如須確診請結合臨床癥狀以及其他檢測手段。

注意事項：

1.所有操作嚴格按照說明書進行；

2.試劑盒內各種組分使用前應自然融化，完-全混勻并短暫離心；

3.反應液應避光保存；

4.反應中盡量避免氣泡存在，管蓋需蓋緊；

5.使用一次性吸頭、一次性手套和各區專用工作服；

6.樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區進行，以免交叉污染；

7.實驗完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器；

8.試劑盒里所有物品應視為污染物對待，并按照《微生物生物醫學實驗室生物安全通則》進行處理。

9.本產品僅供科研。

選擇我們的雞馬立克病毒（MDV）PCR檢測試劑盒，就是選擇精準、高效、可靠的檢測方案，為您的科研實驗保駕護航！