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化工儀器網>產品展廳>試劑標物>行業專用試劑>生化與分子生物學用試劑>P0819 Tricine-SDS-PAGE凝膠配制試劑盒 常備現貨

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P0819 Tricine-SDS-PAGE凝膠配制試劑盒 常備現貨

具體成交價以合同協議為準

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北京諾博萊德科技有限公司始創于2012年,總部位于北京海淀區,專注于科研生物領域,是一家研發、銷售和服務于一體的企業。公司秉承“誠信為本,博采眾長”的發展理念,致力于為科研工作者提供高質量的生物產品和服務。

諾博萊德的產品覆蓋面廣泛,包括以下

生化試劑:抗生素、蛋白質、染色劑、培養基、緩沖試劑、對照品、標準品、磁珠;

即用型試劑:常規試劑溶液、即用型染色液、免疫學試劑、細胞生物學、分子生物學、檢測試劑盒、細胞分離液人或其他動物細胞;

通用耗材:移液管/架、吸頭、槍頭、移液器、離心管/盒/架、PCR耗材、濾紙、口罩手套、冷/凍存管/盒、培養板/皿/瓶、蓋/載玻片、刀片、包埋盒/框、封片劑、石蠟、鏡油等產品被國內科研工作者廣泛應用。

 

生化試劑,即用型試劑,分子生物學,細胞生物學

供貨周期 現貨 規格 30T
貨號 P0819 應用領域 環保,化工,生物產業,農業,制藥
主要用途 適用于分離大分子蛋白

諾博萊德 Tricine-SDS-PAGE凝膠配制試劑盒


Tricine-SDS-PAGE凝膠配制試劑盒 常備現貨

產品簡介:

聚丙烯酰胺凝膠電泳(Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)原理在于聚丙烯酰胺凝膠為網狀結構,具有分子篩效應。它有兩種形式:非變性聚丙烯酰胺凝膠及 SDS-聚丙烯酰胺凝膠;非變性聚丙烯酰胺凝膠,在電泳的過程中,蛋白質能夠保持完整狀態,并依據蛋白質的分子量大小、蛋白質的形狀及其所附帶的電荷量而逐漸呈梯度分開,主要用于分離蛋白質和寡核苷酸。常規 SDS-PAGE凝膠電泳適用于分離大分子蛋白,對于小分子量的蛋白或多肽,分辨率大大降低。

NobleRyder Tricine-SDS-PAGE  電泳能夠較好的分離 10KD  以下的蛋白或多肽,是電泳法分離多肽的主要方法,30T 一般可以配制 30~35  塊膠,具體配制的量應根據器具大小決定。電泳分離后可直接考馬斯亮藍染色、銀染等。

產品組成:

編號

名稱

P0819

30T

Storage

試劑(A):   49.5%T 3%C

2ml

4℃

試劑(B):   49.5%T 6%C

60ml

4℃

試劑(C):   Gel buffer

90ml

4℃

試劑(D):   Glycerol

20ml

RT

試劑(E):   Ammonium Persulfate

0.3g

RT

試劑(F):   TEMED

1ml

4℃  避光

使用說明書

1 份


具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準


操作步驟(僅供參考):

1、  配制 10%過硫酸銨(APS):直接在 0.3g Ammonium Persulfate  中加入 3ml  蒸餾水,充分溶解,分裝成小份儲存于-20℃或 4℃。注意:一般用 1.5mlEP 管分裝成 0.5-1ml每支,-20℃保存,每支使用 2-3 次即棄用。短期使用時,可保存于 4℃,1 周有效。

2、  根據目的蛋白分子量大小選擇合適的凝膠濃度,按照附表配制分離膠:

①   將不同體積的蒸餾水、49.5%T 6%C、Gel buffer、Glycerol  加入到離心管中充分混合。

②   加入 10%APS  和 TEMED,立即渦旋混勻 5~10s,以使溶液充分混勻。

③   在凝膠模具中迅速灌入適量分離膠溶液(1mm mini-gel,分離膠溶液加約 4ml),然后在分離膠溶液上輕輕覆蓋一層 1~3cm  的水層,使凝膠表面保持平整。

④   靜置,待分離膠和水層之間出現一個清晰的界面表示凝膠已聚合。

3、  根據目的蛋白分子量大小選擇合適的凝膠濃度,按照附表配制夾層膠:

①   去除覆蓋在分離膠上的水層,用濾紙將殘留的水盡量吸去。

②   將不同體積的蒸餾水、49.5%T 3%C  和 Gel buffer  加入到離心管中混合。

③   加入 10%APS  和 TEMED,立即渦旋混勻 5~10s,以使溶液充分混勻。

④   將適量的夾層膠溶液迅速加至分離膠的上面(對于 1mm  的 mini-gel,夾層膠溶液加約1ml),然后在夾層膠溶液上輕輕覆蓋一層 1~2cm  的水層,使凝膠表面保持平整。

⑤   靜置,待夾層膠和水層之間出現一個清晰的界面表示凝膠已聚合。

4、  根據目的蛋白分子量大小選擇合適的凝膠濃度,按照附表配制濃縮膠:

①   去除覆蓋在夾層膠上的水層,用濾紙將殘留的水吸去。

②   將不同體積的雙蒸水、49.5%T 3%C  和 Gel buffer  加入到離心管中混合。

③   加入 10%APS  和 TEMED,立即渦旋混勻 5~10s,以使溶液充分混勻。

④   將梳子插入凝膠內,避免產生氣泡。

⑤   靜置,待凝膠聚合后,小心地拔出梳子,避免破壞加樣孔。進行電泳操作。

5、  電泳

將電泳槽置于 4℃或冰水浴中,外槽加入陽極緩沖液,內槽加入陰極緩沖液,30V  預電泳10 min,將處理好的樣品加入點樣孔, 30V  電泳 1h, 100V  電泳至溴酚藍到達膠底部后停止電泳,進行后續的考馬斯亮藍染色或電轉。

附表  Tricine-SDS-PAGE  凝膠配方表

成分

分離膠

夾層膠

濃縮膠

濃度/體積

20%/4.5ml

16.5%/4.5ml

15.5%/4.5ml

10%/2ml

10%/2ml

49.5%T 3%C

-

-

-

0.407ml

0.16ml

49.5%T 6%C

1.82ml

1.5ml

1.395ml

-

-

Gel buffer

1.5ml

1.5ml

1.5ml

0.667ml

0.667ml

Glycerol

0.48ml

0.48ml

0.48ml

-

-

蒸餾水

0.7ml

1.02ml

1.125ml

0.926ml

1.344ml

10%APS

40μl

40μl

40μl

20μl

20μl

TEMED

5μl

5μl

5μl

3μl

3μl

注意事項:

1、  過硫酸銨配制成 10%APS 溶液后應當-20℃保存,用 2~3  次,亦可 4℃保存幾天。

2、  TEMED  易揮發,使用后請蓋緊瓶蓋。另外凝膠凝聚的速度和溫度及光照關系密切。可通過適當調節 TEMED  的用量,控制在不同的室內環境下凝膠凝聚的速度。

3、  配制聚丙烯凝膠的過程中,如果室溫較低,可以置于 37℃放置,加速凝固。在液體混勻的時候應盡量避免氣泡的產生。

4、  在分離膠上層加蒸餾水時要緩慢,速度不宜過快。

5、  49.5%T 3%C  和 49.5%T 6%C  為不同比例的 Acr-Bis,有輕微神經毒性,請小心操作。

有效期:24 個月有效。


Tricine-SDS-PAGE凝膠配制試劑盒 常備現貨


產品訂購信息:

P0819 Tricine-SDS-PAGE凝膠配制試劑盒 30T



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