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NE-PER核蛋白-胞漿蛋白分離試劑

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       賽默飛世爾科技賽默飛世爾科技(紐約證交所代碼:TMO)是科學服務(wù)領(lǐng)域的世界領(lǐng)導者。公司年銷售額超過250億美元。在全球擁有約70,000名員工。我們的使命是攜手客戶,讓世界更健康、更清潔、更安全。我們幫助客戶加速生命科學領(lǐng)域的研究、解決在分析領(lǐng)域所遇到的復雜問題與挑戰(zhàn),促進醫(yī)療診斷發(fā)展、加速藥物上市進程、提高實驗室生產(chǎn)力。我們?nèi)虺^75,000名賽默飛員工將借助于一系列行業(yè)領(lǐng)先的品牌Thermo Scientific、Applied Biosystems、Invitrogen、Fisher Scientific、Unity Lab Services和Patheon,為客戶提供另想的創(chuàng)新技術(shù)、便捷采購方案和全方位服務(wù)。

      欲了解更多信息,請瀏覽公司網(wǎng)站:www.thermofisher.com 賽默飛世爾科技中國簡介賽默飛世爾科技進入中國發(fā)展已超過35年,在中國的總部設(shè)于上海,并在北京、廣州、香港、成都、沈陽、西安、南京、武漢、昆明等地設(shè)立了分公司,員工人數(shù)約為5000名。我們的產(chǎn)品主要包括分析儀器、實驗室設(shè)備、試劑、耗材和軟件等,提供實驗室綜合解決方案,為各行各業(yè)的客戶服務(wù)。為了滿足中國市場的需求,現(xiàn)有7家工廠分別在上海、北京、蘇州和廣州等地運營。我們在全國還設(shè)立了8個應(yīng)用開發(fā)中心以及示范實驗室,將世界級的前沿技術(shù)和產(chǎn)品帶給中國客戶,并提供應(yīng)用開發(fā)與培訓等多項服務(wù);擁位于上海的中國創(chuàng)新中心,擁有有100多位專業(yè)研究人員和工程師及70多項專利。創(chuàng)新中心專注于針對垂直市場的產(chǎn)品研究和開發(fā),結(jié)合中國市場的需求和國外先進技術(shù),研發(fā)適合中國的技術(shù)和產(chǎn)品;我們擁有遍布全國的維修服務(wù)網(wǎng)點和特別成立的中國技術(shù)培訓團隊,在全國有超過2600名專業(yè)人員直接為客戶提供服務(wù)。我們致力于幫助客戶使世界更健康、更清潔、更安全。

      欲了解更多信息,請登錄網(wǎng)站:www.thermofisher.com 全國服務(wù)熱線:021-61621892公司電子郵箱:sales.china@thermofisher.com

科學儀器

    Thermo Scientific NE-PER核蛋白-胞漿蛋白抽提試劑盒提供了高效的核蛋白抽提方法,用戶只需擁有臺式微量離心機、離心管和移液器,進行簡單的分步式細胞裂解及核蛋白與胞漿蛋白離心分離即可。NE-PER 試劑盒能夠高效地將胞漿蛋白與核蛋白溶解和分離為不同組分,交叉污染以及基因組 DNA/mRNA 的干擾均降到了。一旦經(jīng)過脫鹽或稀釋,分離后的蛋白即可用于免疫分析和蛋白相互作用實驗,如遷移率分析(EMSA)、免疫共沉淀 (Co-IP) 和拉下實驗。
     
    • 快速-2小時內(nèi)獲得胞核與胞漿內(nèi)的可溶性蛋白組分,交叉污染以及基因組DNA/mRNA的干擾均降到了
    • 可靠-超過“萬篇”的文獻出鏡率,廣受科研工作者喜愛
    • 通用-培養(yǎng)細胞或者組織(新鮮樣本)
    • 高活性-獲得樣本適合于多種下游應(yīng)用,包括免疫印跡、凝膠遷移分析(EMSA)、報告基因分析以及酶活性分析
    • 可擴展—兩種規(guī)格試劑盒,滿足從細胞和組織中抽提樣本的應(yīng)用需求
    • 方便—操作簡單,無需超速梯度離心

    圖1.獲取的細胞核和細胞質(zhì)組分幾乎無交叉污染。采用NE-PER細胞核和細胞質(zhì)抽提試劑與其他品牌的細胞核抽提試劑盒提取 HeLa 細胞。使用常用的核蛋白、胞質(zhì)蛋白和膜蛋白標志物的抗體,采用NE-PER 試劑盒所得的細胞核組分幾乎無胞質(zhì)或膜蛋白污染。

                  
    圖2. 抽提各種組織中蛋白的Western Blot結(jié)果。使用NE-PER核蛋白和胞漿蛋白抽提試劑,從不同組織中富集和分離核蛋白和胞漿蛋白,并分別進行Western Blot檢測。

    分離胞核和制備核蛋白抽提物的方法很多,但大多數(shù)制備核蛋白抽提物的制備方法都很耗時,并需要機械勻漿、凍融循環(huán)、反復離心或透析,而這些都可能影響核蛋白的完整性。NE-PER 核蛋白-胞漿蛋白抽提試劑盒使用了基于試劑的分離方案,能夠分步裂解細胞并從胞漿中分離出完整的細胞核,然后再從基因組 DNA 與 mRNA 中抽提核蛋白。這一溫和的過程可在兩小時之內(nèi)完成,且使用培養(yǎng)細胞時僅需標準的桌臺式離心機即可。此外,用戶還可以從細胞培養(yǎng)物或組織樣本中分離得到具有活性的核蛋白與胞漿蛋白。

    本試劑盒能夠從兩百萬個細胞中提出 200 至 500µg 胞漿蛋白和 100 至 200µg 的核蛋白(濃度為 1mg/mL)。一般情況下,胞漿蛋白與核蛋白之間的交叉污染在 10% 左右。本方法分離得到的主要是細胞核中的可溶蛋白,而非與染色質(zhì)結(jié)合的蛋白或核膜整聯(lián)蛋白。可通過調(diào)整核抽提試劑(NER)的體積來改變胞核抽提物的蛋白濃度,而不會對抽提效率造成顯著影響。從細胞中專一地抽提核蛋白是許多基因調(diào)控研究的關(guān)鍵,然而現(xiàn)有的許多分離細胞核、制備核蛋白抽提物的方法都十分耗時,且需要進行機械勻漿、凍融循環(huán)、重復離心或透析等操作,對許多脆弱的核蛋白的完整性造成影響。NE-PER 試劑盒能夠克服這些問題,通過 EMSA 及其他分析技術(shù)為用戶提供高質(zhì)量的濃縮核蛋白抽提物。

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