NE-PER核蛋白-胞漿蛋白分離試劑
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- 公司名稱 賽默飛世爾科技(中國)有限公司
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- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2024/12/16 13:40:21
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- Thermo Scientific NE-PER核蛋白-胞漿蛋白抽提試劑盒提供了高效的核蛋白抽提方法,用戶只需擁有臺式微量離心機、離心管和移液器,進行簡單的分步式細胞裂解及核蛋白與胞漿蛋白離心分離即可。NE-PER 試劑盒能夠高效地將胞漿蛋白與核蛋白溶解和分離為不同組分,交叉污染以及基因組 DNA/mRNA 的干擾均降到了。一旦經(jīng)過脫鹽或稀釋,分離后的蛋白即可用于免疫分析和蛋白相互作用實驗,如遷移率分析(EMSA)、免疫共沉淀 (Co-IP) 和拉下實驗。
- 快速-2小時內(nèi)獲得胞核與胞漿內(nèi)的可溶性蛋白組分,交叉污染以及基因組DNA/mRNA的干擾均降到了
- 可靠-超過“萬篇”的文獻出鏡率,廣受科研工作者喜愛
- 通用-培養(yǎng)細胞或者組織(新鮮樣本)
- 高活性-獲得樣本適合于多種下游應(yīng)用,包括免疫印跡、凝膠遷移分析(EMSA)、報告基因分析以及酶活性分析
- 可擴展—兩種規(guī)格試劑盒,滿足從細胞和組織中抽提樣本的應(yīng)用需求
- 方便—操作簡單,無需超速梯度離心
圖1.獲取的細胞核和細胞質(zhì)組分幾乎無交叉污染。采用NE-PER細胞核和細胞質(zhì)抽提試劑與其他品牌的細胞核抽提試劑盒提取 HeLa 細胞。使用常用的核蛋白、胞質(zhì)蛋白和膜蛋白標志物的抗體,采用NE-PER 試劑盒所得的細胞核組分幾乎無胞質(zhì)或膜蛋白污染。
圖2. 抽提各種組織中蛋白的Western Blot結(jié)果。使用NE-PER核蛋白和胞漿蛋白抽提試劑,從不同組織中富集和分離核蛋白和胞漿蛋白,并分別進行Western Blot檢測。
分離胞核和制備核蛋白抽提物的方法很多,但大多數(shù)制備核蛋白抽提物的制備方法都很耗時,并需要機械勻漿、凍融循環(huán)、反復離心或透析,而這些都可能影響核蛋白的完整性。NE-PER 核蛋白-胞漿蛋白抽提試劑盒使用了基于試劑的分離方案,能夠分步裂解細胞并從胞漿中分離出完整的細胞核,然后再從基因組 DNA 與 mRNA 中抽提核蛋白。這一溫和的過程可在兩小時之內(nèi)完成,且使用培養(yǎng)細胞時僅需標準的桌臺式離心機即可。此外,用戶還可以從細胞培養(yǎng)物或組織樣本中分離得到具有活性的核蛋白與胞漿蛋白。
本試劑盒能夠從兩百萬個細胞中提出 200 至 500µg 胞漿蛋白和 100 至 200µg 的核蛋白(濃度為 1mg/mL)。一般情況下,胞漿蛋白與核蛋白之間的交叉污染在 10% 左右。本方法分離得到的主要是細胞核中的可溶蛋白,而非與染色質(zhì)結(jié)合的蛋白或核膜整聯(lián)蛋白。可通過調(diào)整核抽提試劑(NER)的體積來改變胞核抽提物的蛋白濃度,而不會對抽提效率造成顯著影響。從細胞中專一地抽提核蛋白是許多基因調(diào)控研究的關(guān)鍵,然而現(xiàn)有的許多分離細胞核、制備核蛋白抽提物的方法都十分耗時,且需要進行機械勻漿、凍融循環(huán)、重復離心或透析等操作,對許多脆弱的核蛋白的完整性造成影響。NE-PER 試劑盒能夠克服這些問題,通過 EMSA 及其他分析技術(shù)為用戶提供高質(zhì)量的濃縮核蛋白抽提物。
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