肝切除模型
- 公司名稱 上海晨曄生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2024/12/17 11:22:29
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產(chǎn)地類別 | 國產(chǎn) | 應用領(lǐng)域 | 綜合 |
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肝部分切除基本以30%、50%、70%和90%肝切除為主,根據(jù)肝葉比例進行相應切除,但右上葉和右下葉同屬一個功能單位,兩者有一段融合共用的脈管系統(tǒng),單獨切除其中一部分容易損傷殘留肝葉脈管系統(tǒng)的通暢性。肝切除對肝再生的刺激強度與所切除肝臟的質(zhì)量有直接的關(guān)系,切除量大于85%或小于30%均可導致再生緩慢。
構(gòu)建小鼠 70%肝臟切除模型
實驗動物選擇:
小鼠肝臟分葉結(jié)構(gòu)明顯并都有相對獨立的肝靜脈系統(tǒng)和Glisson系統(tǒng),各肝葉比重相對固定,便于進行不同比例肝部分切除,且其膽囊解剖更接近人類。且小鼠大部分肝切除模型是當前研究肝臟再生的最佳模型,可用于模擬肝臟再生的起始、增殖和終止階段。
肝切除模型造模方法:
(一)用2%異氟的烷氣體麻醉小鼠。
(二)腹部消毒后,取劍突下腹部正中豎切口,長度 1.5cm-3cm,開腹時注意不要損傷腹腔器官組織,依次切開表皮、肌層及腹膜,找到肝臟,用鑷子拉開并固定兩側(cè)腹肌,充分暴露肝臟。
(三)用眼科剪游離與肝臟相關(guān)的韌帶,先后結(jié)扎肝中葉及左外側(cè)葉并切除,注意保留膽囊;結(jié)扎時要靠近肝葉基底,盡量減少肝葉的殘留和對血管的損傷,結(jié)扎時動作要輕柔,避免撕扯到肝下的血管。
但值得注意的是,結(jié)扎中葉時線結(jié)的位置不能太靠近肝上的腔靜脈,否則會導致靜脈閉塞或狹窄,阻礙殘留的右葉和尾葉的血液回流,從而導致肝組織的壞死和再生的失敗。因此,線結(jié)的位置應該超過膽囊,但與上腔靜脈的距離應不小于2mm。
(四)回納剩余肝組織及腹內(nèi)容物,依次縫合關(guān)腹,縫合后再次消毒切口。術(shù)后禁食禁水6h。皮下注射5%葡萄糖的注射液替代術(shù)中蒸發(fā)損失,出血和液體移位中的液體損失,并作營養(yǎng)用,放置于37℃溫箱復溫6h。
(五)以手術(shù)結(jié)束為0h,根據(jù)分組時間點要求分別于術(shù)后24h、72h、7d將動物處死,稱量并記錄各組再生肝臟的重量,取樣。肝組織收集后迅速-80℃低溫冰箱保存。
構(gòu)建肝臟缺血再灌注損傷模型
實驗動物選擇
缺血再灌注損傷實驗模型多選用大鼠等嚙齒類動物來建立。相對與大小鼠而言,小鼠具有飼養(yǎng)成本低、空間利用率高、藥劑消耗量小、操作同步性好等優(yōu)點。
動物品系:Balb/c小鼠,雄性,周齡為6-8w
造模方法
1、 術(shù)前12h禁食,自由飲水。
2、 腹腔注射麻醉,麻醉成功后將小鼠平躺在手術(shù)的臺上膠帶固定四肢,將小鼠腹部術(shù)去毛,用碘酒和75%乙醇術(shù)區(qū)消毒。
3、 取腹正中切口1cm,打開腹腔,小心分離出肝臟供血的門靜脈和肝動脈。
4、 用無創(chuàng)血管的夾夾閉門靜脈和肝動脈,0.5min后,肉眼可見阻斷葉明顯變白,說明阻斷成功,用止血的鉗夾閉皮膚切口臨時關(guān)閉腹腔,將小鼠放恒溫加熱毯上保溫。
5、 完成持續(xù)缺血60min后,重新打開腹腔,迅速取出血管的夾,恢復缺血肝血流,0.5min左右可見缺血區(qū)肝臟由白色逐漸恢復為鮮紅色表明再灌注成功,逐層縫合腹腔肌肉和皮膚關(guān)閉腹腔,完成手術(shù)。待小鼠清醒后放回飼養(yǎng)室飼養(yǎng),密切關(guān)注小鼠的狀態(tài)及生存狀況并做好記錄。